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| pGAPZαA/HD5酵母表达载体的构建 | |
| 作者姓名： | 吴学敏 单颖 李华 卢颖 佟伟 张轶博 李会 |
| 作者单位： | 辽宁医学院免疫与病原生物学教研室,辽宁,锦州,121000 |
| 摘 要： | 目的 利用分子生物学技术和方法将pGAPZαA质粒改建为带有人防御素5(HD5)基因的新型表达载体pGAPZαA/HD5,为大量生产和提纯具有生物活性人防御素5抗菌肽的研究提供实验基础.方法 PCR技术,以设计的引物P1/P2从克隆载体pMD18-T/HD5中扩增人防御素5基因片段,并将扩增出来的目的 基因和pGAPZαA质粒用EcoRI和XbaI双酶切后连接构成重组质粒,然后转化至E.coli Top10感受态细胞,筛选阳性克隆.最后对PCR及酶切鉴定含有目的 基因的克隆进行测序和电泳.结果 获得HD5基因片断大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的 基因的正确序列;电泳结果证明已将此片段克隆到pGAPZαA内.结论 成功构建了HD5基因的新型表达载体pGAPZαA/HD5. |
| 关 键 词： | 人防御素5 克隆 表达载体 毕赤酵母 |
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