| 人J链基因的克隆及原核表达研究 |
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| 引用本文： | 王宪灵,安黎云,王缚鲲,李玮,贾克然,时兰春. 人J链基因的克隆及原核表达研究[J]. 中国现代医学杂志, 2009, 19(18) |
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| 作者姓名： | 王宪灵 安黎云 王缚鲲 李玮 贾克然 时兰春 |
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| 作者单位： | 1. 白求恩国际和平医院,河北,石家庄,050082
2. 白求恩军医学院,河北,石家庄,050081 |
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| 基金项目： | 河北省卫生厅医学科学研究重点项目计划指令性课题 |
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| 摘 要： | 目的 用基因工程技术在大肠埃希菌中表达人J链基因重组蛋白,为研究其功能及开发检测J链抗原的试剂盒奠定基础.方法 提取人脾细胞总RNA,以此为模板,通过RT-PCR的方法获得J链基因.将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,构建J链表达载体,测序证实正确后转化至E coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE,表达产物经免疫印迹法(western blot,WB)鉴定其免疫反应性.结果 测序结果证实笔者成功地获得了J链基因,其序列与GenBank中报道完全一致.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白在Ecoli BL21中获得表达,其相对分子量约为15KD左右,表达的蛋白量约占菌体蛋白的15%.结论 成功克隆了人免疫球蛋白J链基因,并在大肠杆菌中获得表达.
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| 关 键 词： | J链 逆转录PCR 克隆 基因表达 |
Cloning and prokaryotic expression of human immunoglobulin J chain gene |
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| WANG Xianling , AN Liyun , WANG Fukun , LI Wei , JIA Keran , SHI Lanchun. Cloning and prokaryotic expression of human immunoglobulin J chain gene[J]. China Journal of Modern Medicine, 2009, 19(18) |
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| Authors: | WANG Xianling AN Liyun WANG Fukun LI Wei JIA Keran SHI Lanchun |
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