| 高通量端粒酶抑制剂筛选模型融合表达载体的构建及转化 |
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| 引用本文： | 王卫国,曹莹,张群,张慧敏,刘晓萍,孔焕育,庞建新,吴曙光.高通量端粒酶抑制剂筛选模型融合表达载体的构建及转化[J].中国现代医学杂志,2009,19(13). |
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| 作者姓名： | 王卫国 曹莹 张群 张慧敏 刘晓萍 孔焕育 庞建新 吴曙光 |
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| 作者单位： | 南方医科大学药学院新药评价中心,广东,广州,510515 |
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| 摘 要： | 目的 构建含不同结构域的人端粒酶逆转录酶(hTERT)酵母三杂交系统融合蛋白表达载体并转化酵母.方法 采用PCR法从pCLXSN-hTERT质粒中提取不同的hTERT cDNA片段,纯化分离定向克隆到pYESTrp3质粒,构建包含不同hTERT蛋白结构域的编码序列的重组质粒,转化大肠杆菌,经PCR、酶切、测序鉴定,将阳性重组质粒转化酵母菌,进行毒性和自激活检验.结果 经过测序验证,重组融合蛋白表达载体pYESTrp3-hTERT构建成功,转化酵母无毒性和自激活性.结论 成功构建能用于酵母三杂交系统的融合蛋白表达载体,可于酵母三杂交系统筛选端粒酶抑制剂及hTERT和hTR间的相互作用.
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| 关 键 词： | hTERT 酵母三杂交 端粒酶抑制剂 |
Construction and transformation of fusion expression protein used in high throughput screening model for telomeraseinhibitors |
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| WANG Weiguo
,
CAO Ying
,
ZHANG Qun
,
ZHANG Huimin
,
LIU Xiaoping
,
KONG Huanyu
,
PANG Jianxin
,
WU Shuguang.Construction and transformation of fusion expression protein used in high throughput screening model for telomeraseinhibitors[J].China Journal of Modern Medicine,2009,19(13). |
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| Authors: | WANG Weiguo CAO Ying ZHANG Qun ZHANG Huimin LIU Xiaoping KONG Huanyu PANG Jianxin WU Shuguang |
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