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Nogo-66融合蛋白的原核表达及鉴定
引用本文:谢琳,贺翔鸽,苏踊跃,陈渝,Xin-fu ZHOU.Nogo-66融合蛋白的原核表达及鉴定[J].免疫学杂志,2005,21(3):256-258.
作者姓名:谢琳  贺翔鸽  苏踊跃  陈渝  Xin-fu ZHOU
作者单位:1. 第三军医大学大坪医院眼科,重庆 400042
2. 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,重庆 400038
3. 澳大利亚Flinders大学人类生理学系神经科学中心,阿德莱德,南澳大利亚 5001
基金项目:重庆市科委自然科学基金资助项目(CSTC,2004BB5032)
摘    要:目的原核表达轴突再生抑制蛋白Nogo-66,并对其进行鉴定。方法采用聚合酶链反应方法从含Nogo-66编码序列的质粒DNA中扩增出Nogo-66基因开放阅读框,构建原核表达载体,转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,裂解细菌抽提蛋白,表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western免疫印迹鉴定。结果测序鉴定Nogo-66开放阅读框成功插入pET-46-EK/LIC质粒;重组质粒在大肠杆菌中成功表达大鼠Nogo-66蛋白,SDS-PAGE测定其相对分子质量(Mr)约7000,WesternBlot结果证实表达产物融合有聚组氨酸标签。结论应用原核表达系统成功表达了Nogo-66蛋白,为下一步制备Nogo-66蛋白疫苗及疫苗功能研究打下了基础。

关 键 词:Nogo-66  原核表达  融合蛋白
文章编号:1000-8861(2005)03-0256-03
修稿时间:2004年12月31

Identification and prokaryotic expression of Nogo-66
XIE Lin,HE Xiang-ge,Su Yong-yue,CHEN Yu,Xin-fu ZHOU.Identification and prokaryotic expression of Nogo-66[J].Immunological Journal,2005,21(3):256-258.
Authors:XIE Lin  HE Xiang-ge  Su Yong-yue  CHEN Yu  Xin-fu ZHOU
Institution:XIE Lin 1a,HE Xiang-ge 1a,SU Yong-yue 1b,CHEN Yu 1b,Xin-fu ZHOU 2
Abstract:
Keywords:Nogo-66  Prokaryotic expression  Fusion protein
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