| 肝癌选择性溶瘤腺病毒的构建及其体外抑瘤作用 |
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| 引用本文： | 傅 强,王慧萍,韦 芳,李慧明,陈霞芳,王煜非,黄 倩.肝癌选择性溶瘤腺病毒的构建及其体外抑瘤作用[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2009,16(2):113-119. |
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| 作者姓名： | 傅 强 王慧萍 韦 芳 李慧明 陈霞芳 王煜非 黄 倩 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院,附属上海市第一人民医院,中心实验室,上海,200080 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究计划（973）资助项目 (No.2004CB518804);国家自然科学基金杰出青年项目 (No.30325043) |
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| 摘 要： | 目的: 构建由AFP基因增强子启动子调控，并携带自杀基因TK的新型条件复制型腺病毒载体，观察该载体的选择复制能力、溶瘤作用及其与前药GCV联合处理对肝癌细胞的杀伤作用。方法:以HepG2基因组DNA为模板，PCR扩增AFP基因启动子（AFPp）和增强子(AFPe)，构建表达质粒pAFPpEGFPluc和pAFPepEGFPluc，再构建由AFPep调控E1A表达、并携带TK基因的穿梭质粒pDC311AFPepE1A/CMVTK，利用AdMax系统包装腺病毒Ad.AFPepE1A/CMVTK；利用Western blotting、病毒增殖测试、细胞病变效应实验、病毒联合前药GCV对肝癌细胞的杀伤实验等鉴定病毒的复制能力、溶瘤作用和对肝癌细胞的杀伤作用。结果：成功构建的腺病毒载体 Ad.AFPepE1A/CMVTK在AFP阳性细胞中选择性复制，病毒自身具有一定的溶瘤作用；该病毒载体联合GCV前药系统处理肝癌细胞后，AFP阳性肝癌HepG2细胞和Hep3B细胞的存活率分别为(10.35±1.07)%、(15.49±5.80)%，AFP阴性的张氏肝细胞和人肺癌NCIH460细胞的存活率分别为(73.55±436)%、(74.54±9.89)% (P<0.01)。结论:构建的新型溶瘤腺病毒载体具有选择性杀伤肝癌细胞的能力，在肝癌治疗方面有良好的应用前景。
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| 关 键 词： | 肝肿瘤 条件复制型腺病毒载体 HSV-1TK基因 甲胎蛋白基因启动子 甲胎蛋白基因增强子 病毒-基因治疗 |
| 收稿时间： | 2009/2/24 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2009/3/17 0:00:00 |
Construction of conditionally replication-competent adenoviral vectors targeting hepatocarcinoma and their in vitro anti-tumor effect |
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| FU Qiang,WANG Hui ping,WEI Fang,LI Hui ming,CHEN Xia fang,WANG Yi fei and HUANG Qian.Construction of conditionally replication-competent adenoviral vectors targeting hepatocarcinoma and their in vitro anti-tumor effect[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2009,16(2):113-119. |
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| Authors: | FU Qiang WANG Hui ping WEI Fang LI Hui ming CHEN Xia fang WANG Yi fei and HUANG Qian |
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| Institution: | Central Lab, The First People's Hospital of Shanghai, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200080, China;Central Lab, The First People's Hospital of Shanghai, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200080, China;Central Lab, The First People's Hospital of Shanghai, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200080, China;Central Lab, The First People's Hospital of Shanghai, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200080, China;Central Lab, The First People's Hospital of Shanghai, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200080, China;Central Lab, The First People's Hospital of Shanghai, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200080, China;Central Lab, The First People's Hospital of Shanghai, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200080, China |
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