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二维凝胶电泳分离结核分枝杆菌胞外蛋白和膜蛋白
引用本文:何秀云,庄玉辉,张小刚,李国利,丁勤学. 二维凝胶电泳分离结核分枝杆菌胞外蛋白和膜蛋白[J]. 医学研究生学报, 2002, 15(2): 102-104
作者姓名:何秀云  庄玉辉  张小刚  李国利  丁勤学
作者单位:1. 解放军第三○九医院结核病研究室,北京,100091
2. 军事医学科学院基础医学研究所神经生物学研究室,北京,100850
基金项目:“973”资助课题 (No .G19990 5 410 4),解放军第三○九医院基金资助课题 ( 2 0 0 1~ 2 0 0 3)
摘    要:目的 :建立二维凝胶电泳分离结核分枝杆菌 (M .TB)胞外蛋白和膜蛋白的方法。 方法 :M .TBH37Rv菌株在苏通液体培养基培养 3周后获得胞外蛋白和膜蛋白 ,第一相电泳用 pH 3~ 10线性IPG预制胶条进行等电聚焦 ,第二相电泳用SDS PAGE凝胶再分离蛋白。银染PAGE凝胶、干燥 ,用ImageScanner扫描凝胶 ,ImageMaster 2DElite 3 .10 (图像分析软件 )分析 2D图像。 结果 :胞外蛋白和膜蛋白的蛋白质斑点数分别为 90 7和 681,两组蛋白的斑点大部分在酸性区域 (pH <7.0 )。在极碱性区域 ( pH >9.0 ) ,胞外蛋白只有 10个蛋白质斑点 (占1.1% ) ,而膜蛋白有 5 2个蛋白质斑点 (占 7.6% ) ;在极酸性区域 ( pH <4 .0 ) ,膜蛋白只有 15个蛋白质斑点 (占2 .2 % ) ,而胞外蛋白有 99个蛋白质斑点 (占 10 9% )。约 5 0 %的胞外蛋白和膜蛋白相对分子质量 <3 0 0 0 0。 结论 :二维凝胶电泳分离M .TB蛋白是研究M .TB蛋白质组学的重要途径之一。

关 键 词:结核分枝杆菌  二维凝胶电泳  胞外蛋白  膜蛋白
文章编号:1008-8199(2002)02-0102-03
修稿时间:2001-09-12

Separation of extracellular and membrane proteins in mycobacterium tuberculosis using two-dimensional gels electrophoresis
HE Xiu yun ,ZHUANG Yu hui ,ZHANG Xiao gang ,LI Guo li ,DING Qin xue. Separation of extracellular and membrane proteins in mycobacterium tuberculosis using two-dimensional gels electrophoresis[J]. Bulletin of Medical Postgraduate, 2002, 15(2): 102-104
Authors:HE Xiu yun   ZHUANG Yu hui   ZHANG Xiao gang   LI Guo li   DING Qin xue
Affiliation:HE Xiu yun 1,ZHUANG Yu hui 1,ZHANG Xiao gang 1,LI Guo li 1,DING Qin xue 2
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis  Two dimensional gel electrophoresis  Extracellular proteins  Membrane proteins
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