肝细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞异体移植修复烧伤创面

背景：经携带人肝细胞生长因子的重组腺病毒（adenoviral vector mediated human hepatocyte growth factor，Ad-HGF）修饰的骨髓间充质干细胞创面移植后，可分化为“修复细胞”，并能够在创面持续释放肝细胞生长因子。 目的：观察Ad-HGF基因转染的骨髓间充质干细胞异体移植对大鼠烧伤创面愈合的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物观察，于2006-02/2007-03在解放军兰州军区兰州总医院临床实验科和烧伤整形科实验室完成。 材料：Wistar大鼠40只，由解放军兰州军区兰州总医院动物实验科提供。Ad-HGF与携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒（adenoviral vector mediated human hepatocyte growth factor，Ad-GFP）颗粒均由哈小琴博士惠赠。 方法：取雄鼠10只，Percoll密度梯度离心法体外分离培养骨髓间充质干细胞，并行Ad-HGF转染。取雌鼠30只，随机分为未转染细胞组、Ad-HGF转染细胞组、Ad-GFP转染细胞组、Ad-HGF对照组、假伤组，6只/组。前4组大鼠复制背部深Ⅱ度烧伤模型，并分别于创面真皮层下方多点注射对应的细胞悬液或病毒悬液1 mL；假伤组大鼠背部剃毛后浸入37 ℃温水12 s模拟烧伤，同法注射等量生理盐水。 主要观察指标：对采集的创面标本行组织学观察和羟脯氨酸含量测定，采用免疫组化分析创面肝细胞生长因子的表达。 结果：苏木精-伊红染色结果显示，Ad-HGF转染细胞组移植后7 d创面表皮化优于其他组，至21 d再生表皮明显厚于其他组，并可见真皮钉脚下伸。胶原特殊染色结果显示，Ad-HGF转染细胞组移植后7，21 d创面中的胶原排列较其他组整齐。移植后7 d，Ad-HGF转染细胞组羟脯氨酸含量显著低于其他组（F=3.216，P < 0.01）。移植后21 d，Ad-HGF转染细胞组愈合创面中肝细胞生长因子的阳性表达位于真皮层，表达强度明显强于其他组。 结论：Ad-HGF基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞异体移植后，对烧伤创面愈合存在一定的促进作用。

Bone marrow mesenchymal stem cells transfected with hepatocyte growth factor gene for repair of burn wound after allotransplantation