摘 要: | 目的:细胞凋亡的调节紊乱与肿瘤的发生密切相关,已发现维甲类化合物全反式维甲酸ATRA在一些实体瘤细胞系中具有诱导凋亡作用。但在大肠癌中无报道,我们就此作一研究。材料和方法:结肠癌细胞株Lo-Vo在1640培养液中常规培养,取对数生长期细胞进行实验,ATPA溶解在无水乙醇中,实验和对照组乙醇终浓度均为0.05%。①MTT法反映活细胞数量,用MTT法测细胞生长抑制率;②流式细胞仪(FCM)分析细胞周期。FCM测定采用单染色单激光法。标本为10~(-5)molATRA作用后2、4、6d和传2、4、6代的LoVo细胞株;③IXl0~(-5)mol、IXl0~(-6)molATRA作用6d后在电镜下观察凋亡细胞;④用DNA断端标记(TDT)法测定凋亡细胞:凋亡细胞DNA断裂,末端被FITC标记,在荧光显微镜下计算凋亡细胞;⑤核酸电泳:按照Wessenlborg方法进行。结果:①ATRA浓度在10~(-5)~10~(-7)mol对LoVo细胞均有生长抑制作用(P<0.01),是有效药物浓度,生长抑制显示时间剂量依赖性;②流式细胞仪分析细胞周期,结果ATRA能改变LoVo细胞的细胞周期,使G_0/G_1期比例增高,S期下降,细胞被阻滞于G_1:期。10(-5)mol组第6天及传代2、4、6代后G_0/G_1期细胞比例下降,S期逐渐上升并出现亚“G_0/G_1”凋亡峰;③透射电镜下见特征性凋亡细胞,其特点是核膜完整染色质固缩,形成新月形,而对照组
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