| 实时荧光定量PCR检测人APRILmRNA的标准品构建 |
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| 引用本文： | 王行,王惠民,王旭东,鞠少卿,祝文彩,张冬雷.实时荧光定量PCR检测人APRILmRNA的标准品构建[J].中国交通医学杂志,2007,21(1):14-16. |
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| 作者姓名： | 王行 王惠民 王旭东 鞠少卿 祝文彩 张冬雷 |
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| 作者单位： | 南通大学附属医院检验科,南通大学公共卫生学院,江苏,226001;南通大学附属医院检验科,南通大学公共卫生学院,江苏,226001;南通大学附属医院检验科,南通大学公共卫生学院,江苏,226001;南通大学附属医院检验科,南通大学公共卫生学院,江苏,226001;南通大学附属医院检验科,南通大学公共卫生学院,江苏,226001;南通大学附属医院检验科,南通大学公共卫生学院,江苏,226001 |
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| 摘 要： | 目的:构建增殖诱导配体(APRIL)基因的重组质粒的标准品。方法:从肺癌的组织标本中抽提总RNA逆转录合成cDNA,以cDNA为模板扩增目的片段,从胶中回收目的片段,再将回收的目的片段与pGEM-TEasy载体连接并转化宿主菌DH-5α,分别用菌落PCR及测序两种方法证实目的片段已成功转染细菌。抽提重组质粒DNA用核酸分析仪测浓度后换算成copies/ml。结果:成功构建了APRIL实时荧光定量标准品的线性范围105～1012copies/ml,批内与批间CV分别为1.34%～3.07%和7.24%～11.41%。结论:该法制备的质粒标准品具有较好的灵敏度和重复性,满足实时荧光定量实验要求。
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| 关 键 词： | 增殖诱导配体 聚合酶链反应 质粒标准品 T-A克隆 |
| 文章编号： | 1006-2440（2007）01-0014-03 |
| 收稿时间： | 2006-09-12 |
| 修稿时间： | 2006年9月12日 |
Construction of the standards for detecting APRIL with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction |
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| WANG Xing, WANG Huimin, WANG Xudong, et al.Construction of the standards for detecting APRIL with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction[J].Chinese Medical JOurnal of Communications,2007,21(1):14-16. |
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| Authors: | WANG Xing WANG Huimin WANG Xudong |
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| Institution: | Affiliated Hospital of Nantong University,School of Public Health,Nantong University,Jiangsu 226001 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | A proliferation-inducing ligand Nucleic acid amplification technique plasmid standard T-A clone |
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