| 先天性长QT综合征HERG基因真核表达质粒的构建及体外表达 |
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| 引用本文： | 赵永辉,崔长琮,李宇. 先天性长QT综合征HERG基因真核表达质粒的构建及体外表达[J]. 中国心血管病研究杂志, 2007, 5(8): 603-606 |
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| 作者姓名： | 赵永辉 崔长琮 李宇 |
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| 作者单位： | 河南省人民医院心内科，西安交通大学第一医院心内科环境与疾病相关基因教育部重点实验室，西安交通大学第一医院心内科环境与疾病相关基因教育部重点实验室 |
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| 摘 要： | 目的构建携带HERG目的基因的真核表达重组质粒pcDNA3-HERG,并观察HERG基因在心肌细胞中的表达情况。方法应用基因重组技术,将原核克隆载体pGEM-HERG中HERG基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3,以酶切和聚合酶链反应(PCR)方法鉴定重组质粒pcDNA3-HERG的正确性;以Lipofectamine为介导将重组质粒与荧光真核表达载体pRK5-GFP共转染培养的乳兔心肌细胞,转染48h后荧光显微镜下观察计算转染效率并采用Western Blot和全细胞膜片钳技术检测HERG基因的表达情况。结果酶切和PCR结果均证实pcDNA3-HERG的正确性,以脂质体为介导,其转染心肌细胞的效率为(15.2±2.6)%;Western Blot和膜片钳技术检测到HERG蛋白和HERG通道电流的表达。结论成功构建HERG基因真核表达重组质粒pcDNA3-HERG,转染心肌细胞后可表达有功能的离子通道,为今后研究突变型HERG的功能提供了可行的技术平台。
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| 关 键 词： | 心脏病/先天性 重组,遗传 基因表达 基因,HERG |
| 文章编号： | 1672-5301(2007)08-0603-04 |
| 修稿时间： | 2007-04-11 |
Construction of eukaryotic expression vector of congenital long QT syndrome HERG gene and its expression in vitro |
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| ZHAO Yong-hui%CUI Chang-cong%LI Yu. Construction of eukaryotic expression vector of congenital long QT syndrome HERG gene and its expression in vitro[J]. Chinese Journal of Cardiovascular Review, 2007, 5(8): 603-606 |
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| Authors: | ZHAO Yong-hui%CUI Chang-cong%LI Yu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Heart disease/congential Recombination genetic Gene expression Genes HERG |
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