黄芪对高糖腹透液诱导大鼠腹膜间皮细胞EMT中TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的 观察黄芪对高糖腹透液诱导大鼠腹膜间皮细胞EMT中TGFβ1/Smads信号蛋白的影响，探讨黄芪对腹膜纤维化的阻抑作用与机制。方法 实验分为5组，每组10只。阴性对照组：每日腹腔注射生理盐水20mL/只，共35d；模型组：每日腹腔注射4.25%葡萄糖腹透液20mL/只，共35d；黄芪低、中、高剂量组：于造模第16天开始每日腹腔注射黄芪腹透液（腹透液中加入黄芪注射液，分别含黄芪生药终浓度10、20、40mg/mL）20mL/只，共20d。HE染色观察腹膜病理改变；快速免疫组化法检测腹膜组织TGFβ1、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ、FN、Ecadherin、αSMA的表达；Western blot检测腹膜组织TGFβ1、Ecadherin、αSMA、Smad2/3、psmad2/3、Smad7蛋白的表达；RTPCR检测TGFβ1、Ecadherin、αSMA、Smad7mRNA表达。结果 ①模型组PMCs呈圆形或柱形，有脱落，间皮下基质增生，大量成纤维样细胞及单核、巨噬细胞浸润，纤维素样物质沉积，腹膜组织TGFβ1、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ、FN表达上调，黄芪各干预组上述变化有改善，以高剂量组作用较为明显；②模型组EMT标记蛋白αSMA表达上调，Ecadherin表达下调，高、中剂量黄芪组能一定程度地逆转腹膜组织Ecadherin表达下降与αSMA高表达；③模型组Samds信号蛋白psmad2/3、Smad7表达上调，黄芪可不同程度地下调psmad2/3高表达，增强Samd7的表达，高剂量组作用较为显著。结论 高糖腹透析液可促使PMCs EMT的发生，黄芪很可能通过抑制TGFβ1，并作用于Smads信号转导通路正、负反馈环路中的Smad2/3、Smad7关键信号蛋白，阻抑PMCs EMT的发生。