片仔癀调控ABCC1抑制大肠癌HCT-8/5-FU细胞药物外排功能的作用机制研究

目的探讨片仔癀对大肠癌HCT-8/5-FU细胞对药物外排功能的影响,并探讨其机制。方法MTT法检测5-FU对HCT-8/5-FU细胞和HCT-8细胞活力的影响和片仔癀对HCT-8/5-FU细胞活力的影响;倒置显微镜观察片仔癀对HCT-8/5-FU细胞形态的影响;采用罗丹明染色通过流式细胞仪检测片仔癀对其在耐药细胞内蓄积的影响;RT-PCR检测ABC转运蛋白家族重要成员ABCC1的表达。结果 MTT检测结果显示不同浓度的5-FU干预可显著降低HCT-8细胞活力,呈现一定的剂量依赖和时间依赖,而对HCT-8/5-FU细胞活力未见影响。经片仔癀干预后,HCT-8/5-FU细胞活力也受到显著的抑制;形态学观察表明:随着药物浓度的升高,细胞数目逐渐减少,体积缩小,出现悬浮、脱落而死亡;罗丹明蓄积实验显示:片仔癀干预可显著增加其在细胞内的蓄积;RT-PCR实验表明:经片仔癀干预可显著下调HCT-8/5-FU细胞ABCC1在m RNA水平的表达。结论片仔癀可抑制HCT-8/5-FU细胞生长和药物外排功能,通过下调转运蛋白ABCC1的表达是其重要机制之一。