| 建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1细胞的活性检测方法及抑制剂的筛选 |
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| 引用本文： | 韩学诚,唐雪妮,夏宗玲. 建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1细胞的活性检测方法及抑制剂的筛选[J]. 药学与临床研究, 2022, 30(5): 423-426 |
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| 作者姓名： | 韩学诚 唐雪妮 夏宗玲 |
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| 作者单位： | 南京医科大学附属常州二院,常州市德安医院,苏州大学附属第三医院 |
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| 基金项目： | 江苏省研究型医院学会精益化用药-石药专项科研基金项目（JY202034）；江苏省药学会-天晴医院药学基金科研项目（Q202029） |
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| 摘 要： | 摘 要 目的：建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1的细胞（hOAT1）中6-羧基荧光素浓度测定的荧光分析方法，并用于hOAT1细胞活性的测定及其抑制剂的筛选。方法：采用荧光分光光度法，检测波长为激发波长485 nm，发射波长520 nm，BCA法检测样品蛋白浓度。以6-羧基荧光素的荧光强度对蛋白浓度的比值作为衡量转运体OAT1活性的指标。结果：在hOAT1细胞中，6-羧基荧光素检测浓度的线性范围为0.08～3.2 μmol·L－1（r ＝ 0.999 1），低、中、高浓度6-羧基荧光素溶液测定的日内RSD分别为6.08%、 2.66%、0.86%，日间RSD分别为7.83%、3.73%、0.72%，绝对回收率分别为（111.35 ± 9.8）%、（86.61 ± 3.89）%、（100.15 ± 1.10）%。抑制剂筛选结果显示 1 mmol·L－1缬沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦、辛伐他汀、瑞舒伐他汀对hOAT1抑制率分别为103.45%、110.34%、93.41%、90.33%、79.84%、95.22%。结论：本方法简单易行，可用于hOAT1细胞活性测定，缬沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦、辛伐他汀、瑞舒伐他汀对hOAT1存在抑制作用。
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| 关 键 词： | hOAT1细胞；OAT1活性；荧光分光光度法；BCA法；6-羧基荧光素；抑制剂筛选 |
| 收稿时间： | 2022-05-19 |
| 修稿时间： | 2022-08-20 |
Establishment of Methods to Detect the Activity of Stably Expressing Human Organic Anion Transporter OAT1 Cells and Screening of Inhibitors |
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| Han Xuecheng,Tang Xueni and xia zongling. Establishment of Methods to Detect the Activity of Stably Expressing Human Organic Anion Transporter OAT1 Cells and Screening of Inhibitors[J]. Pharmacertical and Clinical Research, 2022, 30(5): 423-426 |
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| Authors: | Han Xuecheng Tang Xueni xia zongling |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hOAT1 cells OAT1 activity Fluorescent spectrophotometer BCA method 6-carboxyfluorescein Inhibitor screening |
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