用维生素B_(12)、叶酸、三磷酸腺苷、辅酶A作外周血淋巴细胞染色体培养的方法介绍

目前在培养人体外周血淋巴细胞染色体的方法系采用RPMI—1640加小牛血清作培养基。此法虽好,但1640为进口培养基,价钱昂贵,且不易买到,给实验工作带来一定困难。笔者试用生理盐水,内加维生素B_(12)、叶酸、辅酶A、三磷酸腺苷等培养人体外周血淋巴细胞染色体,共作了30例获得满意结果。现将方法介绍如下,供同道参考。一、培养液制备:在无菌操作下取pH7.4磷酸盐缓冲液10ml,加入药用叶酸O.5mg。溶解后,以0.9％注射用生理盐水加至100ml,混匀,再加入维生素B_(12)500μg、辅酶A500u、三磷酸腺苷(ATP)100mg、植物血凝素(PHA)100mg,以6％碳酸氢钠液词pH至7.4,然后每培养瓶内分装5ml作培养液。