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转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因“双抗12-5”玉米外源基因重组蛋白的消化稳定性研究
摘    要:目的评价转Cry1Ab/Cry2Aj、G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米"双抗12-5"中的外源基因重组蛋白在模拟胃肠液中的消化稳定性。方法根据国家标准建立体外模拟胃肠环境消化体系,样品或对照都以5 mg/ml的浓度模拟胃液消化,2 mg/ml的浓度模拟肠液消化。分别于反应0 s、15 s、2 min、30 min和60 min时取出200μl模拟消化液,加入上样缓冲液并沸水浴5 min终止反应,再进行十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、染色并观察结果。结果大豆胰蛋白酶抑制剂(soybean trypsin inhibitor,STI)在模拟胃、肠液中60 min仍不能被全部消化,酪蛋白(α-casein)在模拟胃、肠液中0~15 s内全部消化,Cry1Ab/Cry2Aj重组蛋白在模拟胃、肠液中0~15 s内完全消化,G10evo(EPSPS)重组蛋白在模拟胃液中0~15 s内全部消化,在模拟肠液中2~30 min内全部消化。结论转Cry1Ab/Cry2Aj、G10evo(EPSPS)基因玉米的外源基因重组蛋白在模拟胃、肠液中不具有消化稳定性,容易被降解。

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