C225偶联磁性白蛋白纳米球的制备、表征及联合磁流体热疗体外靶向抗肺癌的研究

目的：制备抗表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor，EGFR）单抗西妥昔（C225）偶联的磁性白蛋白纳米球，对其表征并联合磁流体热疗观察其体外抑制肺癌细胞的效果。方法：化学共沉淀法制备Fe3O4磁性纳米粒，去溶剂化?交联法制备磁性白蛋白纳米球（magnetic albumin nanospheres，MANs），然后用双功能交联剂N?琥珀酰亚胺?3?（2?吡啶二硫代）丙酸酯［N?succinimidyl?3?（2?pyridyldithio）propionate，SPDP］将C225偶联其上制备C225?MANs。纳米球的形态、平均粒径、zeta电位、抗体结合率、含铁量、细胞靶向性及磁热动力学均被表征。最后采用CCK?8及流式细胞（flow cytometry，FCM）分析检测C225?MANs介导的体外双靶向磁流体热治疗肺腺癌细胞GLC?82的效果。结果：透射电镜显示制备的C225?MANs为球形，Fe3O4纳米粒被封装其内，Fe含量约2.0 mg/mL；平均水合粒径约为140 nm，带负电；在输出电流20 A、输出频率200 kHz的交变磁场作用下，不同Fe含量的C225?MANs能在 60 min内升温到39.3 ℃~52.0 ℃，且加热30 min后温度能保持恒定。FCM荧光检测显示抗体结合率为79.74%。免疫荧光实验和细胞MRI成像证实C225?MANs能够靶向GLC?82细胞。CCK?8与FCM分析显示双靶向联合治疗组的细胞增殖率明显低于其他治疗组，而凋亡率明显高于其他治疗组（P < 0.05）。结论：C225?MANs对肺腺癌细胞GLC?82具有良好的靶向效应，且双靶向磁流体热疗联合分子靶向治疗在体外能有效抑制肺癌细胞。