人主动脉内皮细胞体外培养方法的建立及生物学活性鉴定

目的：建立体外人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells,HAECs）提取和培养的方法。方法：从术中取下的人主动脉组织上剥离内皮层,Ⅰ型胶原酶消化分离HAECs,利用显微镜观察其生长状况,免疫组织化学方法及流式细胞法鉴定及检测细胞纯度,以氧化低密度脂蛋白（oxidized low?density lipoprotein,ox?LDL）检测细胞吞噬功能并检测细胞在体外的血管生成能力。结果：0.1%及0.2%的Ⅰ型胶原酶,最佳消化时间均为50 min,2 h贴壁细胞数分别（25.2 ± 2.1）×103,（40.5 ± 3.8）×103）个。细胞融合后在倒置显微镜下呈“鹅卵石”样排列生长。血小板?内皮黏附分子（platelet endothelial cell adhesion molecule?1,CD31）及Ⅷ因子鉴定为阳性,细胞纯度达（96.43 ± 4.12）%。细胞内吞ox?LDL及血管生成能力较好。结论：钝性分离主动脉内皮层,辅以Ⅰ型胶原酶消化是一种较好的HAECs获取方法,酶浓度及消化时间是其重要的影响因素。