药载比对和厚朴酚-分枝状聚乙二醇聚合物G2纳米粒形态及体外抗肿瘤活性的影响

目的 采用分支状聚乙二醇化聚合物G2制备不同药载比的和厚朴酚（HK）纳米粒，考察其稳定性、体外释放及细胞毒等体外表征，以期丰富现有的纳米载药系统并筛选合适的药载比。方法 采用超声-蒸发法将有机相（HK和G2的丙酮溶液的混合相）缓慢注入到去离子水中，减压旋蒸除去有机溶剂即得HK-G2纳米粒（HK-G2-Nps），分别制备药载比为1∶1、2∶1、4∶1、8∶1的纳米粒。利用马尔文粒度分析仪测定HK-G2-Nps粒径、Zeta电位及聚合物分散性指数（PDI）值；高效液相色谱（HPLC）法测定各药载比载药量；用扫描电镜观察其形态；动态膜透析法进行体外释药试验；以乳腺癌4T1细胞为模型用MTT法评价质量浓度为50.0、10.0、5.0、2.5、1.0、0.5、0.1 μg/mL的各药载比HK-G2-Nps细胞毒作用。结果 各药载比HK-G2-Nps的粒径分布较为集中，分散较为均匀；载体G2的用量影响HK-G2-Nps的粒径大小，随着药载比的增加，粒径逐渐减小，载药量提高。稳定性结果显示，纳米粒室温下放置稳定；纳米粒在0.9% NaCl中粒径明显增大，在5%葡萄糖溶液、PBS缓冲液和血浆中可稳定存在。电镜结果显示，药载比为1∶1时，纳米粒没有均一的形态；药载比为2∶1时，纳米粒呈现出不规则的类球状；药载比为4∶1时，呈现出规则均一的球形；药载比达到8∶1时，纳米粒呈现出明显的立方柱状形态同时存在不规则球状。体外释放试验结果显示，在前24 h，纳米粒能够迅速释放，药载比为4：1时累计释放最高，可达70%左右；24 h之后，4个药载比均缓慢释放至120 h，药载比1∶1和2∶1的累计释放率均在60%左右，药载比4∶1和8∶1的累计释放率可达80%、89%。HK-G2-Nps各药载比4T1细胞增殖抑制率均大于游离组HK，药载比为4∶1时作用最显著，其中质量浓度50.0、10.0、2.5、1.0、0.5、0.1 μg/mL显著高于HK组（P<0.05），半数抑制浓度（IC₅₀）值为3.83 μg/mL。结论 成功筛选并制备药载比为4∶1的HK-G2-Nps，其对乳腺癌4T1细胞增殖抑制率大于HK。

Effect of drug loading ratio on honokiol-branched polyethylene glycol polymer G2 nanoparticles morphology and in vitro antitumor activity