氯诺昔康体外孵育体系的建立及氯诺昔康代谢产物5 OH氯诺昔康的检测

摘 要 目的：建立一个以氯诺昔康为底物来研究CYP2C9*1在体外代谢活性的体系并利用UPLC MS/MS来检测氯诺昔康代谢产物，为临床上相关药物的合理用药提供依据。方法: 以氯诺昔康为底物，利用重组昆虫细胞微粒体体外孵育法，模拟与体外孵育相似的环境进行体外代谢，通过建立UPLC MS/MS检测氯诺昔康代谢产物，采用Graphpad prism 软件绘制米曼曲线，计算Km值和最大反应速度Vm，从而通过氯诺昔康来研究CYP2C9*1中的体外代谢活性。结果: 在最终确定的色谱条件下，氯诺昔康、其代谢产物及内标峰分离良好。Km值为1.201 μmol·L-1，最大反应速度Vmax值为0.276 2 pmol·min-1·mg-1。结论: 本研究通过UPLC MS/MS建立CYP2C9*1酶代谢活性检测方法，此方法方便快捷、灵敏性高、准确性好，适用于氯诺昔康代谢产物的测定研究。同时通过氯诺昔康建立了体外孵育体系，为CYP2C9*1酶代谢活性的研究提供了参考依据。