巢氏PCR检测血片中低密度间日疟原虫的研究

【摘要】目的 探讨巢式PCR应用于检测低密度疟原虫血片DNA的方法。 方法 以健康人抗凝血为稀释液提取不同浓度梯度间日疟原虫血片DNA，测定其最低检出限，将一份含有高密度间日疟原虫的抗凝血样按照1：10、1：100、1：1000、1：2000、1：4000、1：8000、1：16000、1：32000比例进行稀释，制成9个浓度梯度血样。每个浓度血样按照厚血膜5ul、薄血膜2ul同时制作2张血片，连续稀释（9个稀释度）一份含有高密度间日疟原虫的EDTA抗凝血样本，制作标准血片，同时进行所制得的血片中厚、薄血膜通过显微镜计数后，分别用以提取DNA，进行和巢式PCR检测。 结果 间日疟原虫血片厚血膜的检出限为1：16000（08个虫/μl血），薄血膜检出限为1：100，与镜下计数水平一致。 结论 巢式PCR适用于低密度血片中间日疟原虫DNA的检测，具有较高的检测意义。