| 骨形态发生蛋白基因真核表达质粒的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 王海彬,刘少军,樊粤光,何伟,刘武,徐传毅,姜自伟,曾意荣.骨形态发生蛋白基因真核表达质粒的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达[J].广州中医药大学学报,2006,23(6):522-525. |
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| 作者姓名： | 王海彬 刘少军 樊粤光 何伟 刘武 徐传毅 姜自伟 曾意荣 |
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| 作者单位： | 广州中医药大学第一附属医院骨科,广州,510405 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(编号:30400606)，广东省自然科学基金资助项目(编号:04010036)，广东省科技厅基金资助项目(编号:粤科社字2004,139号)，广州中医药大学创新基金资助项目(编号:K004044) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆人骨形态发生蛋白(BMP4)基因,构建真核表达质粒,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达,为进一步研究以BMP4进行骨修复的基因治疗奠定基础。【方法】采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,从人的松质骨中扩增BMP4的环形脱氧核糖核酸(cDNA),插入pGEM-Teasy载体,测序证实后,将其亚克隆至质粒PCDNA3.1B(-)中构建BMP4真核表达载体;采用脂质体将重组质粒转染CHO细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,以RT-PCR和免疫组织化学方法鉴定转染细胞中BMP4基因的表达。【结果】经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,RT-PCR和免疫组化方法证明转基因CHO细胞克隆中存在人BMP4基因。【结论】成功获得了人BMP4的全长基因,且序列与已知序列高度一致。
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| 关 键 词： | 骨形态发生蛋白 基因疗法 骨疾病 |
| 文章编号： | 1007-3213（2006）06-0522-04 |
| 收稿时间： | 2006-01-11 |
| 修稿时间： | 2006年1月11日 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector of Bone Morphogenetic Protein Gene and Its Expression in Chinese Hamster Ovarian Cells |
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| WANG Haibin,LIU Shaojun,FAN Yueguang,HE Wei,LIU Wu,XU Chuanyi,JIANG Ziwei,ZENG Yirong.Construction of Eukaryotic Expression Vector of Bone Morphogenetic Protein Gene and Its Expression in Chinese Hamster Ovarian Cells[J].Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine,2006,23(6):522-525. |
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| Authors: | WANG Haibin LIU Shaojun FAN Yueguang HE Wei LIU Wu XU Chuanyi JIANG Ziwei ZENG Yirong |
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| Institution: | Dept. of Orthopedics, the First Affiliated Hospital, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BONE MORPHOGENETIC PROTEIN GENE THERAPY BONE DISEASES |
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