| PUMA-BH3结构域肽的改造、表达及抗肿瘤活性 |
| |
| 引用本文： | 张宇雯,李冀宏,董兴丽,刘远莉,刘岩,刘兴汉. PUMA-BH3结构域肽的改造、表达及抗肿瘤活性[J]. 医学分子生物学杂志, 2019, 16(3): 203-209 |
| |
| 作者姓名： | 张宇雯 李冀宏 董兴丽 刘远莉 刘岩 刘兴汉 |
| |
| 作者单位： | 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市,150081;哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市,150081;哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市,150081;哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市,150081;哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市,150081;哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市,150081 |
| |
| 基金项目： | 黑龙江省教育厅科技研究项目 |
| |
| 摘 要： | 目的改造、表达人PUMA-BH3结构域基因,并检测其抗肿瘤活性。方法改造PUMA BH3结构域两端的氨基酸序列(A134G、G138A、Q151M),并在C端加上5个连续的精氨酸,人工合成相应的核昔酸序列,连接到质粒pTWIN1中,再转化至大肠埃希菌BI21(DE3)中表达,经几丁质亲和层析树脂一步纯化获得M28肽。分别用MTT比色法测定细胞增殖的抑制,AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡,JC-1染色流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果M28肽对人SGC-7901胃腺癌细胞的增殖具有明显的抑制作用,且存在量效关系,活性强于PUMA-BH3肽。作用24h后,观察到细胞凋亡现象,M28肽处理组凋亡细胞数量较PUMA-BH3肽组明显增加,细胞凋亡率大于50%;弱荧光细胞比例增加到90 %以上,提示SGC-7901 细胞线粒体内膜功能受损。结论 M28肽具有更强抗肿瘤活性,且生产工艺简单,在肿瘤治疗上有潜在的应用价值。
|
| 关 键 词： | BH3结构域 基因改造 重组表达 抗肿瘤活性 |
Gene Modification,Expression of PUMA-BH3 Death Domain Peptide and Its Tumoricidal Activity |
| |
| ZHANG Yu wen,LI Jihong,DONG Xingli,LIU Yuanli,LIU Yan,LIU Xinghan. Gene Modification,Expression of PUMA-BH3 Death Domain Peptide and Its Tumoricidal Activity[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2019, 16(3): 203-209 |
| |
| Authors: | ZHANG Yu wen LI Jihong DONG Xingli LIU Yuanli LIU Yan LIU Xinghan |
| |
| Affiliation: | (Department of Biochemistry and Molecular Biology, Harbin Medical University, Harbin, 150081, China) |
| |
| Abstract: | ZHANG Yu wen;LI Jihong;DONG Xingli;LIU Yuanli;LIU Yan;LIU Xinghan(Department of Biochemistry and Molecular Biology, Harbin Medical University, Harbin, 150081, China) |
| |
| Keywords: | BH3 death domain of PUMA gene modification recombinant expression moricidal activity |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
