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| 转染超抗原SEA肝癌细胞的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 邓晓芳,曾波航,胡伟民,彭燕,涂洪斌,李斌.转染超抗原SEA肝癌细胞的构建及鉴定[J].中华生物医学工程杂志,2005,11(5). |
| 作者姓名： | 邓晓芳 曾波航 胡伟民 彭燕 涂洪斌 李斌 |
| 作者单位： | 1. 广州市肿瘤医院 2. 广州医学院第二附属医院肿瘤科 3. 广州医学院实验医学研究中心,广州,510000 |
| 摘 要： | 目的用基因重组的方法将葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因转染至肝癌细胞.方法先从产SEA标准菌株中提取并扩增SEA全长基因,将SEA基因克隆及亚克隆至真核表达载体pLXSN构建pLXSN-SEA重组质粒,再将重组质粒转染至人肝癌细胞系BEL-7402细胞,用RT-PCR和ELISA法鉴定.结果从产SEA标准菌株ATCC13565中提取并扩增出SEA基因全长片段;SEA基因克隆和亚克隆至真核表达载体pLXSN,经测序证实所得序列与GenBank中的标准序列完全一致;将pLXSN-SEA质粒转染肝癌细胞BEL-7402,经筛选获得稳定表达的抗性单克隆.RT-PCR扩增出约800bp的基因片段,经ELISA分析细胞培养上清中SEA蛋白的含量在皮克的水平.结论成功构建了重组超抗原SEA基因的克隆载体及真核表达载体,将SEA基因转染至肝癌细胞株BEL-7402细胞后癌细胞能够表达并持续分泌SEA蛋白. |
| 关 键 词： | 超抗原 葡萄球菌肠毒素A 肿瘤 免疫 |
Construction and Identification of the Superantigen SEA Transfected Hepatocellular Carcinoma Cells |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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