生物3D打印丹酚酸B⁃海藻酸钠⁃明胶皮肤支架促进糖尿病大鼠创面愈合

目的：探讨生物 3D 打印丹酚酸 B（salvianolic acid B，SAB）-海藻酸钠-明胶皮肤支架对糖尿病大鼠创面的治疗作用。方法：按照SAB占海藻酸钠与明胶总重的百分比制成含0%、0.5%、1.0%、1.5%SAB的生物墨水，采用生物3D打印技术制备不同规格的皮肤支架。扫描电镜观察微观结构，高效液相色谱测定SAB体外累积释放浓度。皮肤支架用于治疗2型糖尿病大鼠创面，分为空白对照组、凡士林纱布组以及皮肤支架组（0%SAB、0.5%SAB、1.0%SAB、1.5%SAB组）。于第7、14天观察创面愈合、渗出情况，同时取创面组织进行HE、Masson、活性氧（reactive oxygen species，ROS）染色，并检测超氧化物歧化酶（super- oxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX）、过氧化氢酶（catalase，CAT）及丙二醛（malondial- dehyde，MDA）水平。结果：扫描电镜下，4组皮肤支架均呈网孔状立体结构，孔隙分布均匀。SAB累积释放量随时间延长逐渐增加。各组创面均愈合良好，1.0%SAB 组创面修复优于其他各组。第 7 天时，1.0%SAB 组 ROS 水平均低于其他各组（P < 0.05）；第14天时，1.0% SAB组ROS水平低于除1.5% SAB组外的其他各组（P < 0.01），1.0% SAB组和1.5% SAB组ROS表达水平差异无统计学意义（P=0.136）。第7天时，1.0%SAB组SOD、GSH-PX及CAT水平均高于其他各组（P < 0.05），MDA水平低于空白对照组、凡士林纱布组及0%SAB组（P < 0.05）；第14天时，1.0%SAB组SOD、GSH-PX及CAT水平高于空白对照组、凡士林纱布组和0% SAB组（P < 0.05），MDA水平低于空白对照组、凡士林纱布组（P < 0.05）。HE染色显示，各组创面皮肤均修复较好，1.0%SAB组新生组织较多。Masson染色显示，第7、14天时，0.5%、1.0%、1.5%SAB组创面胶原蛋白沉积多于其他各组（P < 0.05）。结论：1.0%SAB-海藻酸钠-明胶皮肤支架在第7、14天时不仅可以抑制ROS的产生，并上调各种抗氧化酶的表达，抑制创面组织内氧化应激反应，还可以促进胶原沉积，最终促进糖尿病大鼠的创面愈合。