一步法直接克隆PCR产物 |
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作者姓名: | 阮庆国 |
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摘 要: | 很多耐高温的DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶,因其具有非模板依赖性末端转移酶活性,因而常在PCR产物的3'末端加上一个多余的碱基,通常为3'-dA,从而使通过平端连接克隆PCR产物的效率很低。有几种方法可以解决这个问题。①在dNTP存在的情况下,用T_4DNA聚合酶除去3'末端突出的碱基。②利用具有3'-dT突出末端的载体进行克隆,这种载体有商品。③利用其它的DNA聚合酶,如pfu DNA聚合酶进行PCR得到具平头末端的PCR产物。在本文中,作者介绍了二种对Taq DNA聚合
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