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中药紫菀AFLP技术参数的优化与分析
引用本文:张淼,张露勇,张霞,董丹丹. 中药紫菀AFLP技术参数的优化与分析[J]. 中国药物应用与监测, 2007, 4(3): 39-41
作者姓名:张淼  张露勇  张霞  董丹丹
作者单位:1. 解放军总医院,北京,100853
2. 后勤指挥学院门诊部,北京,100858
摘    要:目的:探讨影响紫菀扩增片断长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)的各种因素,建立并优化紫菀AFLP反应体系,为研究紫菀分子品质性状的技术平台奠定基础。方法:CTAB法提取紫菀基因组DNA,分别用一步法和两步法进行酶切与连接,分别进行预扩增、选扩后,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染检测。结果:本研究建立了适用于紫菀的AFLP体系:用乙醇沉淀DNA,建立的模板不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂,可被限制性内切酶MseI和EcoRI完全酶切;确定两步法进行酶切、连接,酶切时间为37℃3h,连接时间为16℃过夜,缓冲液选用NEB公司Buffer2;选择性扩增后的银染显色在10℃以下。结论:本研究建立的反应体系适用于紫菀基因组DNA的AFLP研究。

关 键 词:紫菀  扩增片断长度多态性  银染
文章编号:1672-8157(2007)03-0039-03
修稿时间:2007-01-09

Establishment and optimization of the AFLP reaction system in Aster tataricus L.f.
ZHANG Miao,ZHANG Lu-yong,ZHANG Xia,et al. Establishment and optimization of the AFLP reaction system in Aster tataricus L.f.[J]. , 2007, 4(3): 39-41
Authors:ZHANG Miao  ZHANG Lu-yong  ZHANG Xia  et al
Affiliation:ZHANG Miao1,ZHANG Lu-yong2,ZHANG Xia1,et al
Abstract:
Keywords:A ster tataricus L.f.  AFLP  Silver-staining
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