| SP110基因过表达慢病毒载体的构建与包装 |
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| 引用本文： | 贾鹏霞,刘丙雨,李新月,张万江,程江,吴江东,马雅静. SP110基因过表达慢病毒载体的构建与包装[J]. 转化医学杂志, 2020, 9(2): 75-78 |
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| 作者姓名： | 贾鹏霞 刘丙雨 李新月 张万江 程江 吴江东 马雅静 |
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| 作者单位： | 新疆 石河子，石河子大学新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室，石河子大学医学院第一附属医院检验科,新疆 石河子，石河子大学新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室，石河子大学医学院第一附属医院检验科,新疆 石河子，石河子大学新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室，石河子大学医学院第一附属医院检验科,新疆 石河子，石河子大学新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室,新疆 石河子，石河子大学新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室，石河子大学医学院第一附属医院检验科,新疆 石河子，石河子大学新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室,新疆 石河子，石河子大学新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室，石河子大学医学院第一附属医院检验科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金委员会-新疆联合基金资助项目（U1803127）；兵团重点领域科技攻关计划项目（2018AB019） |
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| 摘 要： | 目的 构建核体蛋白SP110基因过表达慢病毒载体，并进行慢病毒包装，为研究SP110在结核病中的作用机制奠定基础。方法 利用PCR技术获得SP110基因序列并将其插入到慢病毒穿梭质粒LV5中，获得重组慢病毒质粒V-SP110，经酶切鉴定及DNA测序鉴定后，用RNAi-Mate将重组质粒和慢病毒包装质粒系统(pGag/Pol、pRev、pVSV-G)包装成重组慢病毒颗粒，共转染293T细胞，包装产生慢病毒。通过荧光显微镜或FACS计数荧光细胞，结合稀释倍数计算病毒滴度。结果 酶切鉴定结果显示产生约1 650 bp的片段，片段大小与SP110基因cDNA大小一致。DNA测序比对测序结果与预期SP110基因序列完全一致，说明SP110基因正确插入载体中，成功构建了SP110基因过表达载体。经293T细胞包装后，成功获得病毒滴度为1.0×108 TU/mL的重组慢病毒LV5-SP110。结论 SP110基因过表达慢病毒载体构建与包装成功完成，为进一步探讨SP110基因在结核病发生发展中的作用提供工具。
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| 关 键 词： | SP110基因；慢病毒构建；慢病毒包装 |
Construction and packaging of SP110 gene overexpressed lentivirus vector |
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| JIA Pengxi,LIU Bingyu,LI Xinyue,ZHANG Wanjiang,CHENG Jiang,WU Jiangdong and MA Yajing. Construction and packaging of SP110 gene overexpressed lentivirus vector[J]. Translational Medicine Journal, 2020, 9(2): 75-78 |
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| Authors: | JIA Pengxi LIU Bingyu LI Xinyue ZHANG Wanjiang CHENG Jiang WU Jiangdong MA Yajing |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University, Shihezi Xinjiang 832000, China;,Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University, Shihezi Xinjiang 832000, China;,Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University, Shihezi Xinjiang 832000, China;,Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University, Shihezi Xinjiang 832000, China;,Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University, Shihezi Xinjiang 832000, China;,Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University, Shihezi Xinjiang 832000, China; and Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University, Shihezi Xinjiang 832000, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SP110 gene Lentivirus construction Lentivirus packaging |
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