重组EGFR-γFc融合DNA疫苗联合热疗抗肿瘤免疫的实验研究

目的构建EGFR-γFc融合DNA疫苗并观察其联合41℃热疗对小鼠移植肿瘤的抑制作用。方法以异种同源鸡EGFR膜外部分与IgG的γFc段的基因片段为基础构建真核表达质粒PVAX1／cEGFR-γFc，免疫荧光法检测融合蛋白在真核细胞中的表达，随后将Lewis肺癌移植瘤小鼠随机分为疫苗组、热疗组、合并组和对照组。疫苗组于每只小鼠双侧股四头肌注射100Ixg重组质粒，每5d重复1次，共3次；热疗组对荷瘤小鼠行局部41℃热疗，每5d重复1次，共3次；联合组小鼠按疫苗组小鼠的同样方法注射质粒后同时行局部热疗；对照组小鼠注射生理盐水。末次处理5d后ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞上清液中细胞因子IL-2和IFN-γ的水平，流式细胞仪测定脾细胞淋巴细胞亚群；观察小鼠荷瘤后的生存率；末次处理后14d部分成瘤动物处死，取出瘤体称重，计算抑瘤率。结果联合组小鼠脾淋巴细胞TH1型细胞因子IL-2和IFN-γ浓度较其他各组明显升高（P〈0．01），CD8^＋T淋巴细胞数目增加（P〈0．01），接瘤后14d联合组平均瘤重低于其他各组（P〈0．01），抑瘤率达70％，接瘤后30d联合组动物生存率也高于其他各组。结论41℃热疗可能通过细胞免疫增强EGFR靶向DNA疫苗的抗肿瘤效果，热疗联合EGFR靶向DNA疫苗可能是一种有希望的抗肿瘤途径。