| 野生型及突变型survivin基因重组逆转录病毒的构建及表达研究 |
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| 引用本文： | 杨晓亚,宋建勋,白云. 野生型及突变型survivin基因重组逆转录病毒的构建及表达研究[J]. 第三军医大学学报, 2005, 27(8): 691-693 |
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| 作者姓名： | 杨晓亚 宋建勋 白云 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的构建含绿色荧光蛋白和野生型及第34位氨基酸突变型survivin基因的双顺反子逆转录病毒载体,并进行真核细胞表达.方法用PCR的方法由含survivin基因的真核表达载体扩增所需目的片段,然后将该片段插入逆转录病毒载体pMIG.酶切鉴定重组子,脂质体介导下转染包装细胞Phoenix E,病毒上清感染NIH3T3细胞,RT-PCR检测外源基因mRNA的表达、流式细胞仪检测GFP的表达从而确认外源基因的转录.结果经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功的连接到pMIG载体上.载体转染NIH3T3细胞,RT-PCR显示目的片段mRNA能够表达,流式细胞仪检测GFP获良好的表达.结论成功构建了人survivin基因野生型及突变型逆转录病毒,并在NIH3T3细胞进行了表达,为下一步的研究工作提供了有效的分子工具,并且为将来能在体内应用抑制survivin基因表达的肿瘤治疗奠定基础.
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| 关 键 词： | survivin基因 野生型 突变型 逆转录病毒载体 |
| 文章编号： | 1000-5404(2005)08-0691-03 |
| 修稿时间： | 2004-09-02 |
Construction and expression of wildtype and T34A mutant survivin retrovirus |
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| YANG Xiao-ya,SONG Jian-xun,BAI Yun. Construction and expression of wildtype and T34A mutant survivin retrovirus[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2005, 27(8): 691-693 |
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| Authors: | YANG Xiao-ya SONG Jian-xun BAI Yun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | survivin gene wildtype mutant retroviral vector |
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