姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路抑制晶状体上皮细胞增殖的实验研究 |
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引用本文: | 包秀丽,刘婷婷,张海涛,张利民.姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路抑制晶状体上皮细胞增殖的实验研究[J].天津中医药,2016,33(12):745-749. |
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作者姓名: | 包秀丽 刘婷婷 张海涛 张利民 |
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作者单位: | 内蒙古医科大学附属医院眼科, 呼和浩特 010050,内蒙古医科大学附属医院眼科, 呼和浩特 010050,内蒙古医科大学附属医院眼科, 呼和浩特 010050,内蒙古医科大学附属医院眼科, 呼和浩特 010050 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81360145)。 |
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摘 要: | 目的]探讨姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路对人晶状体上皮细胞(LECs)增殖的影响及其可能的作用机制,为晶状体后囊膜混浊(PCO)的临床治疗提供新的靶点。方法]人LECs系SRA 01/04细胞为研究对象,实验分为3组:Wnt3a组,姜黄素组和对照组。Wnt3a组采用脂质体介导转染技术将Wnt3a c DNA表达载体瞬时转染入人SRA 01/04细胞中,构建PCO的细胞模型。姜黄素组在转染Wnt3a c DNA表达载体48 h后加入20μmol/L姜黄素,对照组转染pc DNA3-HA表达载体。采用Western blot技术验证载体在转染细胞中的表达,CKK-8实验检测姜黄素对SRA 01/04细胞增殖能力的影响,采用免疫细胞化学法检测Wnt3a过表达后增生细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化;Western blot法检测Wnt3a过表达对Wnt/β-catenin下游信号分子cyclin D1和c-Myc蛋白表达的影响;应用免疫荧光法检测Wnt3a过表达后β-catenin表达的定位变化。结果]Western blot检测证实,转染pc DNA3-HA表达载体后,SRA 01/04细胞内Wnt3a蛋白表达明显升高。CKK-8检测表明,姜黄素组SRA 01/04细胞的增殖率明显低于Wnt3a组(t=2.782,P=0.049)。姜黄组SRA 01/04细胞PCNA蛋白表达阳性率为23.6%±4.0%,明显低于Wnt3a组的43.4%±5.4%,差异有统计学意义(t=2.951,P=0.018)。转染后48 h,β-catenin蛋白密集分布于Wnt3a组细胞核和细胞质中,而在对照组仅出现于细胞之中,姜黄素组β-catenin蛋白主要分布于细胞核中,少量分布于细胞质中。Western blot检测姜黄素组Wnt/β-catenin信号通路靶蛋白Cyclin D1和c-Myc蛋白表达明显低于Wnt3a组。结论]在SRA01/04细胞中,姜黄素抑制Wnt3a过表达诱导的Wnt/β-catenin信号通路活化,下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc表达下调,抑制人LECs的增生。
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关 键 词: | 姜黄素 Wnt3a 晶状体上皮细胞 Wnt/β-catenin信号通路 细胞增殖 后囊膜混浊 |
收稿时间: | 2016/8/26 0:00:00 |
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