| 摘 要： | 目的:本研究旨在探讨RNA干扰He La细胞IKCa1基因对中电导钙激活钾通道电流(IKCa1)的影响。方法:采用携带IKCa1基因的p Genesil-IKCa1质粒及p Genesil-HK对照质粒分别转染He La细胞。实验分为Control组(无质粒转染组),p Genesil-HK组和p Genesil-IKCa1组。在荧光显微镜下观察报告基因GFP在He La细胞中的表达情况并将GFP阳性率作为转染效率的评价指标,采用RT-PCR技术检测IKCa1基因的表达水平,应用膜片钳电生理技术记录IKCa1。结果:1 p GenesilHK组和p Genesil-IKCa1组转染率分别为75.3%和72.4%,两组之间阳性率差异无统计学意义(P>0.05);2 p Genesil-IKca1组IKCa1基因的m RNA表达水平明显低于Control组及p Genesil-HK组(P<0.01);3在He La细胞能记录到IKCal电流,该电流具有钙离子依赖性且能被Clotrimazole完全阻断,与Control组及p Genesil-HK组相比,p Genesil-IKCa1组的IKCa1电流电压曲线下移,钳制电压为+60 m V时电流密度为(10.05±3.37)p A/p F,明显低于Control组(21.78±5.54)p A/p F和p Genesil-HK组(20.54±5.29)p A/p F(P<0.01)。结论:通过RNA干扰能有效抑制宫颈癌He La细胞IKCa1电流,为今后开展以IKCal为靶点的宫颈癌的基因治疗提供新的靶点和电生理实验依据。
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