| 携带幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建 |
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| 引用本文： | 徐灿,李兆申,屠振兴,杜奕奇,龚燕芳,金晶,满晓华,孙波,杨哗,许国铭.携带幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建[J].上海医学,2005,28(4):308-311. |
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| 作者姓名： | 徐灿 李兆申 屠振兴 杜奕奇 龚燕芳 金晶 满晓华 孙波 杨哗 许国铭 |
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| 作者单位： | 200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30170427) |
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| 摘 要： | 目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(ureB)基因重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗。方法 抽提Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA，应用聚合酶链反应(PCR)技术从基因组DNA扩增ureB基因，克隆入pucmT载体，检测ureB基因序列，经过酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES，转入感受态大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆，通过PCR和酶切反应进行鉴定。重组载体pIRES-ureB转入减毒鼠伤寒沙门菌LB5000，抽提质粒，再次转入SL7207，反复传代，鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。通过脂质体法将构建好的重组载体pIRES-ureB转染COS-7细胞，SDS-PAGE Western印迹法检测pIRES-ureB表达蛋白的免疫原性。结果 扩增出长约1700bp的ureB基因，测序结果表明扩增出的ureB基因与基因库Hp ureB序列一致，PCR和酶切鉴定结果证实ureB基因克隆人真核表达载体pIRES，并成功构建了Hp ureB基因的减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗，重组核酸疫苗稳定，并且Westem印迹法检测到特异性的蛋白条带。结论 构建了具有免疫反应性的Hp UreB减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗，为进一步探索其体内的免疫作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 尿素酶 疫苗 载体 鼠伤寒沙门菌 |
Construction of a recombinant attenuated Salmonella typhimurium nucleic acid vaccine carrying Helicobacter pylori urease B subunit |
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| XU Can,LI Zhaoshen,TU Zhenxing,et al..Construction of a recombinant attenuated Salmonella typhimurium nucleic acid vaccine carrying Helicobacter pylori urease B subunit[J].Shanghai Medical Journal,2005,28(4):308-311. |
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| Authors: | XU Can LI Zhaoshen TU Zhenxing |
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| Institution: | XU Can,LI Zhaoshen,TU Zhenxing,et al. Department of Gastroenterology,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori Urease Vaccine Vector Salmonella typhimurium |
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