金属硫蛋白拮抗NaAs2O2致DNA损伤的研究

目的] 利用金属硫蛋白基因敲除小鼠和野生型小鼠染毒NaAs2O2,观察不同脏器的细胞DNA损伤的情况,探讨金属硫蛋白的抗NaAs2O2致DNA损伤的作用.方法] 选用成年的金属硫蛋白基因敲除的C57小鼠和野生型C57小鼠,皮下注射NaAs2O2 10 mg/kg,3 h后剖杀动物,取脾脏、胸腺、肝脏和骨髓制成细胞悬液,运用单细胞凝胶电泳技术,观察DNA损伤情况,各脏器计数100个细胞中DNA链断裂的细胞个数及其尾长.并用单因素方差分析进行统计学检验.结果] 基因敲除小鼠在染毒NaAs2O2后,彗星细胞所占比例脾脏16.75%,胸腺18.75%,肝脏8.50%,骨髓17.50%,与对照组相比均有显著差异;而野生型小鼠脾脏8.75%、胸腺12.75%、肝脏1.00%、骨髓14.25%,其中仅肝脏与其对照组比较没有显著差异.野生型的对照组与基因敲除小鼠的对照组比较没有显著差异.在脾脏、胸腺、骨髓中,野生型染毒组彗星细胞数则较基因敲除组小鼠少,具有显著差异.按NaAs2O2染毒导致细胞DNA损伤的严重程度(测量细胞的尾长),基因敲除的小鼠脾脏(6.59±2.73)μm、胸腺(6.91±1.26)μm、肝脏(2.56±1.08)μm、骨髓(7.65±4.51)μm,均显著高于其对照组;野生型的仅肝脏细胞与其对照组比较没有显著差异,各脏器的结果如下脾脏为(2.61±0.12)μm、胸腺为(5.06±2.60)μm、肝脏为(0.29±0.27)μm、骨髓为(6.79±5.70)μm.野生型的脾脏、肝脏与基因敲除小鼠的比较具有显著差异.结论] 野生型小鼠由NaAs2O2导致的脾脏、胸腺、肝脏细胞的DNA损伤轻于MT基因敲除的小鼠,但在骨髓表现不明显.这提示金属硫蛋白可能减轻砷对DNA的损害作用.