人源脂肪细胞SH2B1β基因的克隆表达 |
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引用本文: | 邱国真,陈白虹,曲戎梅,付琛颖,董文其,魏威,王文敬,王萍.人源脂肪细胞SH2B1β基因的克隆表达[J].广东寄生虫学会年报,2009(3):249-252. |
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作者姓名: | 邱国真 陈白虹 曲戎梅 付琛颖 董文其 魏威 王文敬 王萍 |
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作者单位: | 南方医科大学生物技术学院生物制药系,广州510515 |
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摘 要: | 目的获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a(+)重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达。方法利用RT—PCR方法从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段.并插入pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达带6xHis标签的融合蛋白。结果PCR和酶切电泳鉴定结果显示SH2B1β基因克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与GenBank中的人源SH2B1β序列相符,SDS—PAGE电泳结果表明获得相对分子质量约75000的目的蛋白。结论成功获取了人源脂肪细胞的SH2B1β基因,并在BL21(DE3)中高效表达目的蛋白,为下一步表达纯化SH2B1β重组蛋白及蛋白的初步功能研究奠定基础。
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关 键 词: | SH2B1β 克隆 原核表达 |
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