高糖刺激INS-1细胞DNase Ⅰ表达升高对细胞凋亡的影响

目的：探讨脱氧核糖核酸酶Ⅰ（DNaseⅠ）在高糖引起的胰岛β细胞凋亡过程中的作用。方法：实验分3组。正常组、高糖组和高糖＋DNase Ⅰ siRNA组。其中正常组给予含有11．1mmol／L葡萄糖浓度的培养基外，其余2组均给予葡萄糖浓度为30mmol／L的培养基。通过转染外源性DNase Ⅰ siRNA，敲降高糖培养的ⅠNS-1细胞内DNase Ⅰ的表达。采用Westernblot检测DNaseⅠ、caspase-3蛋白表达，流式细胞仪观察细胞凋亡的变化。结果：与正常组相比，高糖可以显著增加INS-1细胞DNase Ⅰ和caspase-3的蛋白表达水平（P〈0．05）；与高糖组相比，高糖＋siRNA组DNaseⅠ敲降后显著降低高糖所引起的细胞内DNase Ⅰ蛋白表达水平（P〈0．05）．同时也显著降低高糖所引起的细胞内caspase-3的蛋白表达水平（P〈0．05）。流式细胞仪结果显示，高糖明显导致细胞凋亡率升高（16．7％），而敲降DNase Ⅰ后则明显减少细胞凋亡的发生（9．9％）。结论：高糖可以诱导细胞内DNase Ⅰ的表达升高，从而介导胰岛β细胞的凋亡，该研究可能为胰岛β细胞凋亡的机制研究提供新的证据。