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细粒棘球蚴感染中TGF-β/Smad信号通路对IL-9调控作用的研究
作者姓名:庞楠楠  安梦婷  张峰波  赵骁  闫芳  丁剑冰
作者单位:新疆医科大学第一附属医院;新疆医科大学基础医学院
摘    要:目的检测细粒棘球蚴病患者肝组织中转化生长因子β(TGF-β)、 Smad3、 Smad7、转录因子PU.1和白细胞介素-9 (IL-9) mRNA表达水平,初步探讨TGF-β/Smad信号通路在细粒棘球蚴感染病灶中对Th9细胞的调控作用。方法以新疆医科大学第一附属医院住院手术的30例棘球蚴病患者(CE患者组)和20例肝血管瘤患者(对照组)为研究对象,取手术中切除的肝脏组织,用Percoll法分离肝脏单个核细胞,实时荧光定量PCR分别检测CE患者组和对照组肝脏单个核细胞中TGF-β、 Smad3、 Smad7、 PU.1和IL-9 mRNA的相对表达水平。采用Spearman相关性分析方法分析感染组肝脏单个核细胞中Smad3 mRNA的相对表达水平与PU.1 mRNA的相对表达水平的相关性。在CE患者组肝脏单个核细胞中加入Smad3抑制剂SIS3进行体外干预(SIS3阻断组),另设PBS对照组,加入等量PBS,采用实时荧光定量PCR检测两组肝脏单个核细胞中PU.1和IL-9 mRNA的相对表达水平, ELISA检测细胞培养上清中IL-9水平。结果实时荧光定量PCR结果显示, CE患者组肝组织中单个核细胞的TGF-β、 Smad3、 PU.1和IL-9 mRNA相对表达水平分别为2.55±1.32、 2.26±1.35、 1.71±0.66和1.67±0.75,均高于对照组的1.54±0.76、 1.34±0.51、 1.27±0.62和1.01±0.50 (P 0.01或0.05); Smad7的相对表达水平为0.49±0.37,低于对照组的0.88±0.50 (P 0.01)。Spearman相关性分析结果显示, CE患者组肝脏单个核细胞中Smad3 mRNA的相对表达水平与PU.1 mRNA的相对表达水平呈正相关(r=0.397, P 0.05)。用SIS3阻断TGF-β/Smad信号通路后,肝脏单个核细胞中PU.1和IL-9 mRNA的相对表达水平为1.00±0.57和0.85±0.50,低于PBS对照组的1.46±0.64和1.32±0.72 (P 0.01)。ELISA检测结果显示,细胞培养上清中IL-9水平为(128.45±41.97) pg/ml,低于PBS对照组的(166.64±57.90) pg/ml (P 0.05)。结论细粒棘球蚴病患者肝脏组织中TGF-β、 Smad2、 Smad3、 PU.1和IL-9表达上调, TGF-β/Smad通路可能参与调控细粒棘球蚴感染中IL-9的表达。

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