结核杆菌免疫保护性抗原Ag85A的基因克隆与表达研究

目的 为结核病新型疫苗研制提供靶基因和鞭抗原。方法 根据结核杆菌H37Rv株免疫保护性抗原Ag85A的基因序列自行设计一对寡核苷酸引物，以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板，通过PCR扩增获得具有完整开架读码框（ORF）的Ag85A抗原基因，并将其正向插入真核和原核穿梭表达型载体pBK-CMV构建重组质粒，重组质粒转入大肠杆菌后IPTG诱导表达，并对其表达产物进行Western-blotting分析。结果 PCR扩增获得了具有完整开架读码框的Ag85A抗原基因；构建了Ag85A抗原基因真核和原核穿梭表达型载体；Ag85A抗原基因在大肠杆菌中实现了稳定表达，结论 成功地对结核杆菌免疫保护性抗原Ag85A进行了基因克隆与表达，为进一步研究其在结核病新型疫苗研制中的应用奠定了基础。