| 蓖麻蚕蛹生物反应器生产重组人表皮生长因子的研究 |
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| 引用本文： | 伍玉婷,黄元姣,雷丹青,吴勇浒,李牡艳,小林淳,王先裕. 蓖麻蚕蛹生物反应器生产重组人表皮生长因子的研究[J]. 生物医学工程学杂志, 2013, 0(1): 136-140 |
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| 作者姓名： | 伍玉婷 黄元姣 雷丹青 吴勇浒 李牡艳 小林淳 王先裕 |
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| 作者单位： | 广西医科大学研究生学院;广西医科大学医学科学实验中心;日本山口大学农学部;广西大学农学院 |
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| 基金项目： | 广西科学研究与技术开发计划项目资助(10100019-20) |
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| 摘 要： | 重组人表皮生长因子(rhEGF)已经广泛应用于医疗和化妆品。以杆状病毒AnpeNPV为基因表达载体,昆虫为生物反应器而建立的蛋白表达系统已获得成功。本文以人表皮生长因子(hEGF)基因替代柞蚕AnpeNPV中的核多角体基因而获得的AnpehEGF病毒为载体、蓖麻蚕蛹为生物反应器表达的rhEGF蛋白质,采用PCR、West-ern blot和ELISA等实验方法对其进行检测,硫酸铵沉淀和Ni-NTA Agrose亲和层析法对其进行分离纯化。实验结果显示,无论是在基因或是蛋白水平上都可检测到rhEGF的表达。AnpehEGF感染蚕蛹后第6d开始检测到rhEGF的表达量快速上升,第12d达到高峰,第3、6、9、12d的表达量分别为19.77、24.90、618.59、1 952.46ng/g,而到了病毒感染后期(第15d)出现了蛋白降解现象。表达的rhEGF通过分离纯化获得了较纯的产品。结果表明蓖麻蚕蛹作为生物反应器生产外源蛋白rhEGF是可行的,说明利用AnpeNPV和蓖麻蚕蛹可开发更加低成本而又高效的rhEGF生产新途径。
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| 关 键 词： | 蓖麻蚕蛹 生物反应器 重组人表皮生长因子 |
Research for the Production of Recombinant Human Epidermal Growth Factor Using Samia Cynthia Ricini Pupae Bioreactor |
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| Wu Yuting,Huang Yuanjiao,Lei Danqing,Wu Yonghu,Li Muyan,KOBA YA SHI Jun,Wang Xianyu. Research for the Production of Recombinant Human Epidermal Growth Factor Using Samia Cynthia Ricini Pupae Bioreactor[J]. Journal of biomedical engineering, 2013, 0(1): 136-140 |
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| Authors: | Wu Yuting Huang Yuanjiao Lei Danqing Wu Yonghu Li Muyan KOBA YA SHI Jun Wang Xianyu |
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| Affiliation: | 1(School of Graduate,Guangxi Medical University,Nanning 530021,China) 2(Medical Scientific Research Center,Guangxi Medical University,Nanning 530021,China) 3(Faculty of Agriculture,Yamaguchi University,753-8511 Yoshida,Japan) 4(Agriculture College,Guangxi University,Nanning 530004,China) |
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| Abstract: | |
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