肝癌细胞裂解物负载的树突状细胞来源的exosomes制备及其抗肝癌免疫活性的研究

目的:制备一种比单纯源于DC的、更有效的新型治疗肝癌的DC来源的exosomes瘤苗,进而探讨其生物学特性、免疫学功能及抗肿瘤免疫活性。方法:用细胞因子诱导培养树突状细胞(dendritic cell,DC),将肝癌细胞HepG2裂解物负载DC后,提取exosomes。透射电镜观察exosomes形态,流式细胞术检测exosomes蛋白分子的表达;其后应用exosomes直接刺激效应淋巴细胞,MTT法检测CTL对靶细胞HepG2的杀伤活性。结果:透射电镜下观察到负载组exosomes为直径50-100nm的膜性微囊,圆形或椭圆形,有完整包膜。FCM检测表明,负载组exosomes含有DC的特征分子(包括CD86、CD83)。负载组来源的exosomes活化的T细胞对HepG2的杀伤率显著高于未负载组及单纯淋巴细胞组(P<0.05)。结论:肝癌细胞裂解物负载能增强DC分泌的exosomes体外诱导CTL效应。本研究为制备高效的exosomes肝癌瘤苗提供了实验依据。