| 抗五步蛇毒ScFv噬菌体显示文库的构建及表达 |
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| 引用本文： | 尹惠琼,范泉水,谭德勇,王双印,孙阳,李刚山,邱薇,余敏.抗五步蛇毒ScFv噬菌体显示文库的构建及表达[J].中国免疫学杂志,2004,20(5):338-340. |
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| 作者姓名： | 尹惠琼 范泉水 谭德勇 王双印 孙阳 李刚山 邱薇 余敏 |
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| 作者单位： | 1. 成都军区联勤部军事医学研究所,昆明,650032
2. 云南大学生化学院生物技术系生化室,昆明,650091 |
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| 摘 要： | 目的 :构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库 ,并从中筛选出阳性克隆。方法 :用五步蛇毒素免疫BALB C小鼠 ,挑选其中效价最高的 3只小鼠提取脾脏组织 ,抽提细胞总RNA ,经RT PCR分别扩增出VH、VL基因片段 ,经Linker连接成ScFv基因 (singlechainvariablefragment) ,再把ScFv基因重组到pCANTAB 5E载体 ,转化至大肠杆菌TG1中表达 ,经辅助噬菌体 (Helperphage)M13K0 7拯救后建成噬菌体显示文库。结果 :经 4轮吸附 洗脱 富集筛选后 ,库容量达到 4× 10 8cfu L ,随机挑取 90个克隆进行ELISA检测 ,结果 16个呈阳性 ,并进行了重复验证。结论 :成功构建出具有一定库容的特异性ScFv噬菌体展示库
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| 关 键 词： | 五步蛇 蛇毒 单链抗体 噬菌体显示文库 |
| 文章编号： | 1000-484X(2004)05-0338-03 |
The construction and expression of anti-agkistrodon acutus guenther ScFv phage displaying library |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Agkistrodon acutus guenther Venom Single chain antibody fragment Phage displaying library |
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