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| shRNA特异性静默大鼠肺泡巨噬细胞TLR2基因对染尘大鼠肺纤维化的抑制作用 | |
| 作者姓名： | 周韶炜 邵伯棕 陈宣辰 张意 |
| 作者单位： | 同济大学附属上海市肺科医院 第二军医大学研管大队临床十队 第二军医大学免疫学教研室 |
| 摘 要： | 目的构建表达大鼠TLR2的shRNA慢病毒载体,并研究其在染尘大鼠肺组织内对巨噬细胞功能的抑制效应。方法设计并构建具有干扰效力的shRNA表达质粒,筛选出对TLR2干扰效果最好的一段序列,使用Gateway方法重组到慢病毒表达载体中进行包装,采用包装好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383,ELISA法检测TGF-β1、IL-1β、IL-6的表达情况;而后,在大鼠矽肺模型中引入TLR2慢病毒载体,观察矽肺发生和进展情况。结果成功筛选出具有良好TLR2表达干扰效果的shRNA,并成功包装入慢病毒,慢病毒滴度为1.0×106TU/ml,转染慢病毒的肺泡巨噬细胞释放TGF-β1、IL-1β、IL-6均显著减少(P<0.05);转导了干扰病毒载体的矽肺大鼠,其矽肺发生发展受抑情况均优于对照组。结论成功构建了表达大鼠TLR2 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制TGF-β1、IL-1β、IL-6功能,并能有效抑制矽肺的发生发展,揭示TLR2可能成为治疗肺纤维化的潜在靶点。 更多还原 |
| 关 键 词： | 矽肺 Toll样受体2(TLR2) 短发夹RNA(shRNA) 肺泡巨噬细胞 转化生长因子β1(TGF-β1) 白介素-1β(IL-1β) 白介素6(IL-6) |
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