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结核分枝杆菌RD1区PPE68/GST融合蛋白表达质粒的构建及表达
引用本文:曾林子,陈建平,刘成君,李红霞,姚卫,杨志荣. 结核分枝杆菌RD1区PPE68/GST融合蛋白表达质粒的构建及表达[J]. 医学争鸣, 2007, 28(1): 59-61
作者姓名:曾林子  陈建平  刘成君  李红霞  姚卫  杨志荣
作者单位:四川大学,生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川,成都,610052;四川大学,华西医学中心基础医学与法医学院寄生虫教研室,四川,成都,610052;四川大学,绵阳市疾病预防控制中心,四川,绵阳,621000
基金项目:国家自然科学基金,四川省学术与技术带头人培养基金
摘    要:目的:构建结核分枝杆菌PPE68/GST融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌JM109中诱导表达. 方法: 利用PCR技术从结核杆菌H37Rv中扩增Rv3873基因,并将其定向克隆pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Rv3873并转化E.coli JM109,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.采用GST蛋白纯化试剂盒进行重组融合蛋白纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组表达产物. 结果:成功构建原核表达质粒pGEX-4T-1-Rv3873并表达出约Mr 63 000大小的PPE68/GST融合蛋白,占总菌体的40%. Western Blot检测该融合蛋白能和结核患者多价抗血清发生反应. 结论:成功地构建了原核表达质粒pGEX-4T-1-Rv3873,并在大肠杆菌得到表达.

关 键 词:结核分枝杆菌  RD1区  PPE68/GST融合蛋白  表达
文章编号:1000-2790(2007)01-0059-03
修稿时间:2006-07-11

Construction and expression of Mycobacterium tuberculosis PPE68/GST fusion protein expression plasmid
ZENG Lin-Zi,CHEN Jian-Ping,LIU Cheng-Jun,LI Hong-Xia,YAO Wei,YANG Zhi-Rong. Construction and expression of Mycobacterium tuberculosis PPE68/GST fusion protein expression plasmid[J]. Negative, 2007, 28(1): 59-61
Authors:ZENG Lin-Zi  CHEN Jian-Ping  LIU Cheng-Jun  LI Hong-Xia  YAO Wei  YANG Zhi-Rong
Affiliation:1 Key Laboratory of Ministry of Education for Biological Resources and Ecological Environment, 2Department of Parasitology,College of Preclinical and Forensic Medicine, West China Medical Center, Sichuan University, Chengdu 610052, China, 3Mianyang Center for Disease Control and Prevention, Mianyang 621000, China
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis    PPE68/GST   expression
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