LAIR基因的克隆、原核表达及免疫反应性鉴定

目的：克隆和表达淋巴细胞相关免疫球蛋白样受体(1euko—cyte—associated immunoglobulin—1ike recepto，LAIR)，鉴定抗LAIR—1单克隆抗体(mAb)与LAIR—2分子的免疫反应性。方法：利用RT—PCR，从人外周血单个核细胞(PBMC)及白血病细胞系Jurkat和HL-60中克隆了LAIR cDNA。将LAIR—1的脑膜外区基因及LAIR—2cDNA，克隆入GST融合蛋白表达载体pGEX—4T—3中。以其转化E.cobi菌株后，在IPTG诱导下进行表达，表达产物用谷肮甘肽交联的Sepharose 4B纯化。用间接见ELISA法，鉴定抗LAIR—1mRNA对表达蛋白的免疫反应性。结果：克隆并表达了LAIR—1和LAIR—2cDNA。同时克隆了5种新的LAIR—1异型，其中从HL-60细胞克隆的2种包含LAIR—1开放读框(0RF)，从Jurkat细胞中克隆的3种为LAIR—1cDNA片段。mAb鉴定表明LAIR—1与LAIR—2的免疫反应性不同。结论：LAIR基因的转录、转录后的加工及表达，可能与个体和疾病状态有关。LAIR—1和LAIR—2免疫反应性的不同与其构象有关。

Cloning,prokaryotic expression of LAIR and identification of their immunological reactivities