| CX43腺病毒表达载体的构建及其在人胃癌BGC-823细胞系的表达 |
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| 引用本文： | 吴瑾,刘文涛,李永庆,周红凤,刘丹,岳晓龙,孙喜文,石光跃,赵艳滨,王亚丽,仇鑫.CX43腺病毒表达载体的构建及其在人胃癌BGC-823细胞系的表达[J].现代肿瘤医学,2012(11):2231-2236. |
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| 作者姓名： | 吴瑾 刘文涛 李永庆 周红凤 刘丹 岳晓龙 孙喜文 石光跃 赵艳滨 王亚丽 仇鑫 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学附属第三医院肿瘤内科;美国Fred Hutchinson癌症研究中心;哈尔滨医科大学肿瘤研究所 |
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| 基金项目： | 黑龙江省教育厅海外学人科研资助项目(编号:1154h06) |
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| 摘 要： | 目的:构建并鉴定CX43-IRES2-EGFP的重组腺病毒小质粒表达载体,观察其在人胃癌BGC-823细胞系中的表达。方法:将目的基因CX43片段与IRES2-EGFP进行PCR拼接,重组到腺病毒穿梭载体pAd/CMV/V5-DEST上,构建成腺病毒表达载体pAd-CX43-IRES2-EGFP;经酶切后转染293A细胞进行包装,测定滴度;重组病毒转染人胃癌BGC-823细胞后,通过RT-PCR检测耐药基因MDR的变化,Westernblot检测CX43超表达。结果:经测序验证,腺病毒载体pAd-CX43-IRES2-EGFP构建成功。pAd-CX43-IRES2-EGFP病毒的滴度为:2.8×106ifu/ml。转染人胃癌BGC-823细胞后经Western blot检测到CX43蛋白超表达,耐药基因MDR受到抑制。结论:成功构建腺病毒载体pAd-CX43-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系,检测其对人胃癌BGC-823细胞系具有超表达CX43和抑制耐药基因MDR的作用,为CX43基因转染的研究及基于CX43为靶标的基因药物筛选平台的奠定了基础。
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| 关 键 词： | 连接蛋白43 重组 腺病毒 载体 |
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