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The acridine-orange fluorescent method in PHA-stimulated lymphocytes in culture
Authors:Dr med Jan Urbanczyk  Dr Jacek Kujawski
Institution:(1) Present address: Department of Internal Medicine ldquoBrdquo of County Hospital in Opole, Plac Czerwonej Armii 11, Polen;(2) Present address: Laboratory Department of County Hospital in Opole, Plac Czerwonej Armii 11, Polen
Abstract:Summary The effect of Phytohemagglutinine (PHA) on RNA and DNA synthesis in peripheral blood lymphocytes was investigated in vitro by measuring the degree of fluorescence in nucleus, nucleolus and cytoplasm. The results were presented in the colour microphotographs using acridine-orange fluorescent method, which has been proved useful as relatively simple for the evaluation of changes in amount of RNA and DNA in the PHA-lymphocyte. In contrast to the liquid scintillation method and radioautography, the increasing synthesis of nucleic acids is seen later but more pictorially, with excellent preservation of the cell structure.
Zusammenfassung Der Effekt des Phytohämagglutinins (PHA) auf die RNS- und DNS-Synthesen in den Lymphozyten des peripheren Blutes wurde in vitro durch Messung des Fluoreszenzgrades im Zellkern, Nucleolus und Zytoplasma untersucht.Die Ergebnisse wurden als Mikrofarbphotographien mit Hilfe der Acridine-Orange-Fluoreszenzmethode dargestellt, die sich als praktisch und relativ einfach für die Auswertung der Änderungen in der Menge der RNS und DNS erwies.Im Gegensatz zu der Liquid-Scintillation-Methode und zur Autoradiographie wird der Anstieg der Synthesen der Nukleinsäuren später, doch bildhaft eindrucksvoller dargestellt, wobei die Zellstruktur gleichzeitig ausgezeichnet erhalten bleibt.
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