二维电泳联合质谱技术鉴定水溶性晶状体蛋白

目的 应用二维电泳结合质谱分析分离鉴定水溶性晶状体蛋白及观察乙酰化修饰后的γ晶状体蛋白的变化。方法 分别从小鼠及小牛晶状体获得水溶性晶状体蛋白质，并经凝胶过滤层析分离出牛γ晶状体蛋白，进行体外乙酰化；将各晶状体蛋白样品进行二维电泳（2DE），经染色，照相和图像分析，进一步用胰蛋白酶消化，基质辅助激光解吸电离质谱分析鉴定各晶状体蛋白。结果 在2DE电泳图谱上，小鼠水溶性晶状体蛋白有20余个斑点，各晶状体蛋白的相对分子质量多位于18000-30000D范围，主要已鉴定的α，β和γ晶状体蛋白，分别占19%，43%和36%，来自小牛的γ晶状体蛋白主要有5个斑点，其中3个大的点（γB，γD和γs)占总量的90%，体外乙酰化后，带负电荷的斑点数明显增多。结论 2DE结合生物质谱技术是分离鉴定晶状体蛋白的有效手段。并能对其修饰进行分析研究。

Identification of water-soluble lens protein using 2DE integrated with MS