一氧化氮合酶在肝癌血管生成和转移中的作用

观察结构型一氧化氮合酶（cNOS)、血管内皮生长因子（VEGF）及其受体KDP，肥胖抑素（Leptin)及其受体ob-R在正常肝组织、肝硬化和原发性肝癌中表达的不情况，分析它们与微血管密度（MVD）、Ki-67及其相互之间的关系，探讨cNOS及血管生长因子在原发性肝细胞癌血管生成、肿瘤细胞增殖和转移过程中的调节作用。方法 运用原位杂交技术，检测cNOS mRNA在20例正常肝组织、40例肝硬化、80例肝癌标本中的表达分布和定位情况；采用SP免疫组织化学方法，检测VEGF及其受体KDR、Leptin及其受体ob-R在40例正常肝组织、60例肝硬化、95例肝癌标本中的表达变化。结果 （1）肝细胞癌及非癌性肝组织中血管内皮细胞、肝癌细胞及单核／吞噬细胞上均可见有cNOS mRNA的表达；肝细胞癌、肝硬化中内皮细胞cNOS mRNA阳性表达率＞肝硬化组织中的肝细胞＞正常肝组织中的肝细胞；肝癌组织中内皮细胞cNOS mRNA阳性表达者的MVD、细胞增殖指数明显高于阴性表达者；肝癌中细胞增殖指数随着MVD的增大而增高，且有转移倾向的肝癌MVD和细胞增殖指数明显高于无转移倾向的肝癌。（2）VEGF及其受体KDR与肝癌MVD、细胞增殖指数及转移发生率密切相关；肝癌血管内皮细胞cNOS的表达和癌细胞VEGF的表达密切相关，两项均阳性者MVD明显高于cNOS阴性VEGF阳性者，VEGF阴性表达时，cNOS的表达情况对肝癌MVD没有影响。（3）Leptin在肝细胞癌中的表达明显高于肝硬化和正常肝组织，且Leptin强阳性表达者的MVD明显较高，Leptin在肝癌血管内皮细胞上也有表达，而且阳性表达者的MVD及转移发生率显著高于阴性者；肝癌组织中癌细胞Ob-R的表达与MVD之间未见明显相关，血管内皮细胞上可少量Ob-R的表达；肝癌细胞VEGF的表达和血管内皮细胞Leptin的表达呈正相关关系，两项均阳性表达者MVD和转移发生率明显增高；肝癌cNOS与Leptin的表达之间未明显相关。结论 （1）肝癌细胞cNOS的表达可能参与肝癌发生过程；（2）肝癌血管内皮细胞cNOS的表达在肝癌的血管生成和肿瘤细胞增殖过程中起着重要的作用；（3）cNOS和VEGF在肝癌血管生成中相互关联、共同作用，cNOS可能主要在VEGF介导的肿瘤血管生成过程中发挥促血管生成作用；（4）VEGF和Leptin在肝癌的血管生成和转移过程中互相关联、共同作用；（5）cNOS和Leptin在肝癌血管生成方面的作用仅是简单的叠加作用。