| 体外诱导大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)成内皮细胞的实验研究 |
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| 引用本文： | 崔磊,于海莹,尹烁,刘伟,曹谊林. 体外诱导大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)成内皮细胞的实验研究[J]. 中华创伤骨科杂志, 2004, 6(10): 1154-1159 |
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| 作者姓名： | 崔磊 于海莹 尹烁 刘伟 曹谊林 |
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| 作者单位： | 200011,上海市,上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科,上海组织工程研究与开发中心 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)课题(2001AA216021),国家高技术研究发展计划(863计划)课题(2002AA205011) |
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| 摘 要： | 目的体外诱导大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)成内皮细胞,探索其作为血管组织工程内皮种子细胞的可行性.方法冲洗大鼠骨髓腔,通过密度梯度离心得到单个核细胞;按诱导(M199,20%FBS,VEGF 10ng/mL,bFGF2ng/mL)和未诱导(M199,20%FBS)分组培养骨髓单个核细胞,体外培养至第二代;免疫细胞荧光分别检测诱导组和未诱导组细胞VWF、VEGFR-2、VE-cadherin和PECAM-1的表达;流式细胞仪分别检测骨髓单个核细胞、诱导组细胞和未诱导组细胞VEGFR-2、VE-cadherin和PECAM-1表达率;诱导组细胞接种于胶原凝胶中三维培养,观察血管生成能力.结果诱导组原代细胞呈小梭形,5～7d时出现典型的线样结构,P2、P3细胞逐渐成内皮细胞典型铺路石样结构,未诱导细胞未见这两种典型结构;免疫细胞荧光发现,诱导组细胞有VWF、VEGFR-2、VE-cadherin和PECAM-1表达,未诱导组未见明显表达;流式细胞仪检测显示三种标记(VEGFR-2、VE-cadherin和PECAM-1)在原代时的比例均不到总细胞数5%,经两代培养后,诱导组中阳性细胞率高于35%,未诱导组阳性细胞率明显低于诱导组(P＜0.01);三维培养状态下诱导组细胞集落在胶原内有"出芽式"生长.结论本实验建立了一套骨髓EPCs分离、诱导培养和表型检测的方法;以VEGF和bFGF为主要诱导因子的诱导体系,对骨髓EPCs成内皮细胞的诱导阳性率达35%～40%,经诱导的内皮细胞有希望作为血管组织工程新的种子细胞来源.
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| 关 键 词： | 骨髓 内皮祖细胞 内皮细胞 组织工程 |
| 文章编号： | 1671-7600(2004)10-1154-06 |
| 修稿时间： | 2003-11-21 |
In vitro induction of rat bone marrow derived EPCs into endothelial cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bone marrow Endothelial progenitor cells Endothelial cell Tissue engineering |
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