介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶初步筛选研究 |
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引用本文: | 赵锦荣,颜真.介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶初步筛选研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(1). |
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作者姓名: | 赵锦荣 颜真 |
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作者单位: | 第四军医大学肿瘤生物学国家重点实验室,药学系药物基因组学教研室,陕西,西安,710032 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划(973)资助项目,国家高技术研究发展计划(863)资助项目 |
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摘 要: | 目的:以HEK293细胞为研究模型,筛选介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶。方法:将ADAM8、ADAM10、ADAM15和ADAM17cDNA分别克隆入pcDNA3.1/V5载体,并用TransIT-LT1转染试剂将构建好的载体转染入HEK293细胞,用潮霉素B筛选ADAMs蛋白稳定表达克隆;用SDS-PAGE、免疫印迹结合化学发光法检测ADAMs在HEK293细胞中的表达;用细胞表面生物素标记、免疫沉淀、SDS-PAGE、免疫印迹结合化学发光检测ADAMs过表达对可溶性MHCⅠ产生的影响。结果:成功获得稳定表达ADAMs的HEK293细胞;过表达ADAM10和ADAM17可增强HEK293细胞产生可溶性MHCⅠ。结论:ADAM10和AD-AM17具介导可溶性MHCⅠ产生的潜能。
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关 键 词: | 主要组织相容性复合体 去整合素金属蛋白酶 |
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