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| 慢病毒载体法制备红色荧光蛋白转基因小鼠 | |
| 引用本文： | 贾俊双,肖高芳,林晓琳,张晟,姚志芳,杜文婷,申红芬,刘科,饶子亮,孙妍,姚开泰,肖东.慢病毒载体法制备红色荧光蛋白转基因小鼠[J].中国比较医学杂志,2010,20(2):12-16,I0001. |
| 作者姓名： | 贾俊双 肖高芳 林晓琳 张晟 姚志芳 杜文婷 申红芬 刘科 饶子亮 孙妍 姚开泰 肖东 |
| 作者单位： | 1. 南方医科大学,肿瘤研究所 2. 南方医科大学,比较医学研究所暨实验动物中心,广州,510515 3. 南方医科大学,广东省医学实验动物中心,广州,528248 4. 南方医科大学,肿瘤研究所南方医科大学,比较医学研究所暨实验动物中心,广州,510515 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金委员会-广东省联合基金重点项目，国家自然科学基金项目，广东省自然科学基金项目，广东省科技计划项目，广东省医学科学技术研究基金，南方医科大学优秀中青年科技人才库科研资助金和广州地区科学仪器协作共用网专用基金 |
| 摘 要： | 目的利用慢病毒介导的转基因方法制备红色荧光蛋白(mRFP)转基因小鼠,并建立转基因小鼠的技术平台。方法将携带mRFP基因的慢病毒注入ICR鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,胚胎移植进假孕母鼠以获得仔代鼠,然后应用小动物活体成像仪、体视荧光显微镜和PCR等鉴定并获得mRFP转基因鼠。结果移植卵周隙注射有慢病毒的胚胎40枚给2只假孕母鼠,共获得仔鼠6只;利用体视荧光显微镜检测mRFP表达,在蛋白水平证实6只F0代中,2只(R3和R4)鼠耳高表达mRFP,其余的弱表达mRFP(R1、R2和R5)或荧光强度(R6)与野生型ICR鼠无明显差别,而DNA水平检测证实,6只F0代中,5只(R1、R2、R3、R4和R5)基因组中整合有外源转基因hUb-mRFP,预示基因型鉴定结果很好验证了体视荧光显微镜鉴定结果。此外,mRFP转基因首建鼠基因组中整合的mRFP基因可稳定遗传和表达。结论建立了慢病毒法快速制备转基因小鼠的技术平台,这为针对不同基因建立相应转基因小鼠以实现恒定或条件性的转基因过表达或RNA干涉(RNAi),并进而在体内解析相应基因功能和建立人类疾病模型等奠定了坚实基础。 |
| 关 键 词： | 红色荧光蛋白 慢病毒载体法 转基因小鼠 |
mRFP Transgenic Mice Generated by Lentivirus-Mediated Gene Delivery |
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| JIA Jun-shuang,XIAO Gao-fang,LIN Xiao-lin,ZHANG Sheng,YAO Zhi-fang,DU Wen-ting,SHEN Hong-fen,LIU Ke,RAO Zi-liang,SUN Yan,YAO Kai-tai,XIAO Dong.mRFP Transgenic Mice Generated by Lentivirus-Mediated Gene Delivery[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2010,20(2):12-16,I0001. | |
| Authors: | JIA Jun-shuang XIAO Gao-fang LIN Xiao-lin ZHANG Sheng YAO Zhi-fang DU Wen-ting SHEN Hong-fen LIU Ke RAO Zi-liang SUN Yan YAO Kai-tai XIAO Dong |
| Institution: | JIA Jun-shuang~1,XIAO Gao-fang~1,LIN Xiao-lin~1,ZHANG Sheng~2,YAO Zhi-fang~1,DU Wen-ting~1,SHEN Hong-fen~1,LIU Ke~3,RAO Zi-liang~3,SUN Yan~1,YAO Kai-tai~1,XIAO Dong~(1,2)(1.Cancer Research Institute,2.Institute of Comparative Medicine & Center of Experimental Animals,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China,3.Guangdong Medical Laboratory Animal Center,Foshan 528248,China) |
| Abstract: | Objective To establish a technologic platform for generating transgenic mice by lentivirus-mediated delivery of foreign gene(s) into zygotes.Methods\Monomeric red fluorescent protein(mRFP) transgenic mice were generated by subzonal injection of lentivirus harboring mRFP gene into single-cell fertilized eggs of ICR mice to infect fertilized eggs,and subsequently the embryos infected by lentivirus were transplanted into the pseudopregnant mice to attain F0 mice,followed by screening mRFP transgenic mice from ... |
| Keywords: | mRFP Lentiviral vector Transgenic mice |
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